端粒是真核细胞染色体末端的⼀个特殊结构,由⼀段具有特定重复的DNA序列和端粒结合蛋白组成,是维持染色体结构稳定的重要因素。端粒酶是⼀种核糖核酸蛋白酶,能够利用自身RNA为模板合成端粒DNA,使端粒延伸并维持其稳定。端粒酶功能行使最低限度需要两个部分,RNA组成和催化亚单位。RNA组分(human telomerase RNA,HTR)为端粒酶合成端粒重复序列提供了模板,催化亚单位(human telomerase revese transcriptase,hTERT)含有保守的逆转录酶模体。
研究发现HTR在正常组织中也存在,呈弱阳性。在90%以上的肿瘤组织呈强阳性,说明HTR浓度直接反应了端粒酶全酶在组织细胞内的量,也间接反应了端粒酶的活性强度。
试剂盒通过一步法RT-PCR对human telomerase RNA进行扩增反应合成特异片段,并结合使用特异的Taqman-MGB荧光探针技术,以实现实时定量的检测模板的浓度。TaqmanMGB探针的5'端标记为FAM荧光素,3'端标记NFQ(Non Fluorescent Quencher)-MGB。